Mikroskopiska metoder inom mikrobiologi

представляют собой способы изучения разнообразных объектов с использованием специального оборудования. Mikroskopiska forskningsmetoder finns sätt att utforska en mängd olika föremål med hjälp av specialutrustning. Det ger oss möjlighet att ta hänsyn till strukturen av ämnen och organismer, vars storlek är utanför gränserna för upplösning av det mänskliga ögat. Artikeln ger en kort analys av mikroskopiska metoder.

översikt

используют в своей практике разные специалисты. Moderna metoder för mikroskopisk undersökning med hjälp av olika experter i sin praktik. Bland dem är virologer, cytologi, hematologi, morfologi och andra. De viktigaste metoderna för mikroskopisk undersökning är kända under lång tid. Den första är en lätt sätt att se på objekt. Under de senaste åren aktivt introduceras i praktiken, och annan teknik. . Sålunda, populariteten av förvärvad faskontrast, luminescerande, interferens, polarisation, infrarött, ultraviolett, stereoskopisk metod för forskning. Alla av dem är baserade på en mängd olika egenskaper av ljus. . Dessutom används i stor utsträckning elektronmikroskopiska metoder. Dessa metoder medger de visningsobjekt med användning av ett riktat flöde av laddade partiklar. Det bör noteras att dessa studiemetoder används inte bara inom biologi och medicin. в промышленности. Ganska populär metod för mikroskopisk undersökning av metaller och legeringar i branschen. Detta tillåter undersökning för att bedöma beteendet hos föreningarna att producera teknik för att minimera sannolikheten för fraktur och ökad styrka.

Ljus sätt: egenskaper

и других объектов базируются на различной разрешающей способности оборудования. Sådana mikroskopiska metoder för att studera mikroorganismer och andra anläggningar baserade på olika upplösning utrustning. En viktig faktor i detta är riktningen för strålens egenskaper hos själva objektet. Den senare, i synnerhet, kan vara transparent eller ogenomskinlig. I enlighet med egenskaperna hos det föremål, ändra de fysikaliska egenskaperna hos ljusflödet - den ljusstyrka och färg på grund av amplituden och våglängden, plant, fas och riktning vågutbredning. . Om användningen av dessa egenskaper och bygga olika mikroskopiska metoder.

specificitet

För att studera sätten att lätta föremål, oftast färgas. Detta gör det möjligt att identifiera och beskriva dessa eller andra egenskaper. Det är nödvändigt att vävnaden har fastställts, eftersom färg avslöjar vissa strukturer uteslutande i celler dödas. I levande celler separera ett färgämne i form av vakuoler i cytoplasman. Hon inte målar över strukturen. Men med levande objekt och kan undersökas med hjälp av ett ljusmikroskop. För detta ändamål viktigt sätt att lära. I sådana fall, en mörkfältskondensor. Det är inbäddad i ljusmikroskop.

Studera omålade objekt

Det utförs genom faskontrastmikroskopi. Denna metod är baserad på diffraktion av strålen i enlighet med egenskaperna för objektet. Under exponeringen markant förändring i fas och våglängd. I mikroskopet linsen är närvarande genomskinlig platta. Live eller fast, men inte målade föremål på grund av dess öppenhet, nästan ändrar inte färg, och amplituden av strålen som passerar genom dem, provocera bara en förskjutning av vågen fasen. Men i detta fall, efter att ha passerat genom objektet, ljusflödet avlänkas av plattan. Som ett resultat, mellan balkarna, saknad genom objektet och in i en ljus bakgrund, inträffar längden skillnaden vågen. Vid ett visst värde av dess visuella effekt inträffar - det mörka objektet kommer att vara klart synlig på en ljus bakgrund, eller vice versa (i enlighet med egenskaperna hos en fas platta). För att erhålla denna skillnad bör vara minst 1/4 våglängd.

Anoptralny metod

Han är ett slags fas-kontrastmetoden. Anoptralny metoden innefattar användningen av en lins med särskilda plattor, som ändrar endast färg och ljusstyrka hos det omgivande ljuset. Detta utökar möjligheterna att studera ofärgade levande objekt. , паразитологии при изучении растительных и животных клеток, простейших организмов. Tillämpad faskontrastmikroskop metod forskning inom mikrobiologi, parasitologi i studien av växt- och djurceller, protozoer. I hematologi metoden används för att beräkna och bestämma differentiering av blodceller och benmärg.

interferensteknik

решают в целом те же задачи, что и фазово-контрастные. Dessa mikroskopiska forskningsmetoder lösa generellt samma problem som faskontrast. I det senare fallet, experter kan bara observera konturerna av föremål. методы исследования позволяют изучать их части, выполнять количественную оценку элементов. Störnings mikroskopiska forskningsmetoder ger oss möjlighet att studera deras del, genomföra en kvantitativ element bedömning. Detta är möjligt på grund av uppdelning av ljusstrålen. En ström passerar genom partikelobjektet, och den andra - vid. I okularet av mikroskopet de möter och störa. Den resulterande fasskillnaden kan bestämmas genom vikten av olika cellulära strukturer. När sekventiell mätning är med den förutbestämda brytningsindex kan inställas tjocka ofixerade vävnader och levande objekt, proteinhalten däri, koncentrationen av fasta ämnen och vatten, och så vidare. I enlighet med de mottagna data specialister har möjlighet att indirekt utvärdera membranpermeabiliteten, enzymaktivitet, cellmetabolism.

polarisation

Det sker med hjälp av Nicol prismor eller filmy polaroids. De är placerade mellan provet och ljuskällan. позволяет изучать объекты с неоднородными свойствами. Polariserande mikroskopi metod för forskning inom mikrobiologi ger oss möjlighet att studera objekt med inhomogena egenskaper. I isotropa strukturer utbredningshastighet av ljus är oberoende av det valda planet. I anisotropa system hastigheten varierar beroende på ljuset orienterade utmed den tvärgående eller längsgående axeln i objektet. Om brytningsindexvärdet längs strukturen kommer att vara större än längs den tvärgående, skapar en positiv dubbelbrytning. Detta är typiskt för många biologiska föremål som har hittat en strikt molekylär orientering. De är alla anisotropa. I denna kategori, i synnerhet myofibriller, neurofibrils, flimmerhår i cilierade epitel, kollagenfibrer och andra.

polarisationsvärde

En jämförelse av den typ av strålning och brytningsindex-anisotropi hos objektet gör det möjligt att uppskatta den molekylära strukturen av organisationen. Polariseringsmetod fungerar som en av de histologiska analysmetoder som används i cytologi och så vidare. Kan inte bara målade föremål studeras i ljuset. Polarisering metod gör det möjligt att undersöka ofärgade och ofixerade - infödda - beredningar av vävnadssnitt.

fluorescerande tekniker

De är baserade på egenskaperna hos vissa föremål ger glöd i det blå-violetta delen av spektrumet eller UV-strålar. Många substanser, såsom proteiner, vissa vitaminer, koenzymer, droger, utrustade med en primär (sv) luminiscens. Andra föremål börjar glöda genom att lägga till en fluorokrom - speciella färgämnen. Dessa tillsatser är selektivt diffusa eller distribueras i separata cellulära strukturer eller kemiska föreningar. Den här egenskapen var grunden för användning av fluorescensmikroskopi med histokemiska och cytologiska studier.

Användningsområde

Använda immunfluorescens experter upptäcka virala antigener och deras koncentration justeras identifieras virus anti organ och antigener, hormoner, olika metaboliska produkter och så vidare. I detta avseende, diagnos av herpes, påssjuka, hepatit B, influensa och andra infektioner med användning av fluorescerande metoder för materialforskning. иммуно-флуоресцентный способ позволяет распознавать опухоли злокачественного характера, определять ишемические участки в сердце на ранних этапах инфаркта и пр. Mikroskopisk immun fluorescerande metoden upptäcker tumörer malignitet, bestämma ischemiska områden av hjärtat i ett tidigt skede av en hjärtattack och så vidare.

Användning av ultraviolett

Det är baserat på förmågan hos ett antal ämnen i levande celler eller mikroorganismer är fasta, men ofärgat transparent enligt synligt ljus tyger absorberar UV-strålar från en specifik våglängd. Detta är sant i synnerhet för högmolekylära föreningar. Dessa inkluderar proteiner, aromatiska syror (metylalanin, tryptofan, tyrosin, etc), nukleinsyror och purinbaser piramidinovye och så vidare. UV mikroskopi gör det möjligt att ange platsen och antalet av dessa föreningar. I studien av levande proffs kan observera förändringar i deras metaboliska processer.

dessutom

Infraröd mikroskopi används i studien är opaka för ljus och ultravioletta strålar genom absorption av föremålen flödesstrukturer vars våglängd 750-1200 nm. För att tillämpa denna metod finns det ingen anledning att i förväg avslöja droger till kemisk behandling. Vanligtvis är IR-metod som används i antropologi, zoologi och andra vetenskaper industrin. När det gäller medicin, denna metod används främst i oftalmologi och Neuromorphology. Studien-dimensionell föremål med hjälp av en stereoskopiskt mikroskop. hårdvarukonstruktion gör det möjligt att övervaka vänster och höger öga på en annan vinkel. Ogenomskinliga objekt undersöks vid relativt låg förstoring (120 gånger vid de flesta). Stereoskopiska metoder används i mikro, Pathomorphology i rättsmedicin.

elektronmikroskopi

Den används för att studera strukturen av celler och vävnader i de makromolekylära och subcellulära nivåerna. Elektronmikroskopi tillät oss att göra ett kvalitativt språng inom forskningen. Denna metod används ofta i biokemi, onkologi, virologi, morfologi, immunologi, genetik och andra områden. Signifikant förbättring av upplösningen som tillhandahålls av flödeskapacitet av elektroner som passerar genom vakuum elektromagnetiska fältutrustning. Den senare i sin tur skapa speciella linser. Elektroner kan passera genom strukturen av objektet eller reflekteras från dem med avvikelser från olika vinklar. Resultatet visas på den fluorescerande skärmen på enheten. Om transmissionsmikroskopi planvy erhålls vid avsökning av respektive omge.

förutsättningar

Det är värt att notera att innan passet elektronisk mikroskopisk undersökning objektet utsätts för särskild utbildning. I synnerhet, användning av fysikalisk eller kemisk fixering av vävnader och organismer. Sektionsbiopsimaterial och, dessutom, avvattnas, är inbäddad i epoxiharts, skuren glas eller diamantknivar på ultratunna sektioner. Då deras kontrast och studier. Avsökningsmikroskop undersöker ytan av objekt. För att göra detta, sprutas de en speciell substans i vakuumkammare.