Ksantoproteinovaya reaktion till protein: skyltar och formeln ekvationen

För att fastställa den kvalitativa sammansättningen av många livsmedel som används ksantoproteinovaya reaktion till proteinet. Närvaron av aromatiska aminosyror i blandningen kommer att förändras i ett positivt test färgprov.

Vad är protein

Det kallas också ett protein, som är ett byggmaterial för den levande kroppen. Proteiner upprätthålla muskelmassa, återställa skadade och döda vävnadsstrukturer av olika organ, vare sig det hår, hud och ligament. Med deras deltagande, producerar röda blodkroppar, styrs av den normala driften av många hormoner och immunsystemets celler.

Detta är en komplex molekyl som är en polypeptid med en massa större än 6 ~ 10 ³ dalton. Proteinstruktur som bildar aminosyrarester i ett stort antal kopplade peptidbindning.

Strukturen av proteiner

Det utmärkande draget av dessa substanser jämfört med lågmolekylära peptider är att de utvecklade en tredimensionell rumslig struktur, stöds effekter med varierande grad av attraktion. Proteiner besitter fyra-struktur. För var och en av dem har sina egna egenskaper.

Som grund för den primära organisation av molekyler härledda aminosyrasekvens, struktur som känner igen ksantoproteinovaya reaktion till proteinet. Denna struktur är en periodiskt upprepande peptidbindning -HN-CH-CO-, ett selektivt del radikaler är sidokedjorna i aminosyror. De definierar ytterligare egenskaper hos ämnet som helhet.

Den primära proteinstrukturen anses tillräckligt stark, är detta på grund av närvaron av starka kovalenta interaktioner i peptidbindningar. Bildandet av efterföljande nivåer uppträder beroende på de attribut som anges i det inledande skedet.

Bildandet av den sekundära strukturen är möjligt på grund av vridning av aminosyrasekvensen i en spiral, i vilken vätebindningar är etablerade mellan varven.

Tertiär organisationsnivå av molekyler bildas genom att en av en spiral på de andra fragmenten med förekomsten av alla möjliga anslutningar mellan dem, med väte, disulfid, kovalenta eller joniska föreningen. Resultatet är föreningen i form av globuler.

Rymdarrangemanget av de tertiära strukturer med bildningen av kemiska bindningar mellan dem leder till bildning av den slutliga formen av molekylen eller kvaternära nivåer.

aminosyror

De orsakar de kemiska egenskaperna hos proteiner. Det finns ca 20 större aminosyror som utgör de polypeptider i en annan sekvens. Detta också refereras sällsynta aminokarboxylsyra i form hydroxiprolin och hydroxilysin härledd basisk peptid.

Som ett tecken på erkännande ksantoproteinovaya proteinreaktion, ger närvaron av vissa aminosyror färgförändringen av reagens, vilket tyder på närvaro av specifika strukturer i deras sammansättning.

Som det visade sig, är de karboxylsyror som har inträffat substitution av väteatom på aminogruppen.

Ett exempel strukturen hos molekylen kan tjäna en strukturell formel glycin (HNH- HCH- COOH) som den enklaste aminosyran.

I detta fall en av väteatomerna CH ₂ - kan ersättas av en kol längre radikal innefattande en bensenring, amino, sulfo, karboxi.

Vad gör ksantoproteinovaya reaktion

För kvalitativ analys av proteiner med användning av olika tekniker. Dessa inkluderar reaktioner:

• biuret med uppkomsten av violett färg;
• ninhydrin till att bilda en blå-violett lösning;
• formaldehyd med inrättandet av en röd färg;
• Nogier att fälla den grå-svart färg.

Vid utförandet av varje metod bevisade närvaron av proteiner och närvaron av vissa funktionella grupper i molekylen.

Det ksantoproteinovaya reaktion till proteinet. Den kallas också fördelningen Mulder. Den hänvisar till de färgreaktioner för proteiner, i vilka det finns aromatiska och heterocykliska aminosyror.

Ett särdrag hos ett sådant prov process är nitrering syra salpetersyra cyklisk aminosyrarester i synnerhet anslutnings av nitrogruppen till bensenringen.

Resultatet av denna process är bildandet av nitroföreningar, som utfälldes. Detta är den grundläggande funktionen ksantoproteinovaya reaktion.

Vad bestäms aminosyran

Inte alla aminokarboxylsyra kan detekteras med användning ett sådant prov. Det viktigaste kännetecknet för ksantoproteinovaya proteindetekteringsreaktion - närvaron av bensenring eller heterocyklisk ring i molekylen aminosyror.

Eftersom proteinet isoleras från aminokarboxylsyror två aromatiska, i vilka det finns en fenylgrupp (för fenylalanin) och en hydroxifenyl-radikal (i tyrosin).

Med ksantoproteinovaya reaktionen bestäms heterocyklisk aminosyran tryptofan, indol med en aromatisk kärna. Närvaro av ovanstående föreningar i proteinet ger den karakteristiska färgförändringen av testmiljön.

Vad reagenser

För genomförande av reaktionen ksantoproteinovaya behöver förbereda en 1% lösning av äggprotein, eller vegetabiliskt ursprung.

Vanligtvis används ägg, som är uppdelad för ytterligare separation av proteinet från äggula. För en 1% lösning av protein späddes i en tiofaldig mängd av renat vatten. Efter upplösning av det resulterande proteinet vätskan bör filtreras genom flera skikt av ostduk. Denna lösning bör förvaras på en sval plats.

Det är möjligt att utföra reaktionen med ett vegetabiliskt protein. För att framställa lösningen används vetemjöl i en mängd av 0,04 kg. 0,16 liter av renat vatten. Ingredienserna blandades i en kolv som är bunden i 24 timmar på en sval plats vid en temperatur av omkring + 1 ° C. Vid slutet av dagen lösningen omrördes, följt av filtrering därav först med vadd och sedan - ett papper vikt filter. Den resulterande vätskan hölls i en sval plats. Denna lösning är huvudsakligen närvarande i albuminfraktionen.

För genomförande av reaktionen ksantoproteinovaya som huvud reagens som används salpetersyra konc. Ytterligare reagens är en lösning av 10% natriumhydroxid eller ammoniak, gelatinlösningen och okoncentrerad fenol.

Metodiken av

I ett rent rör görs en% proteinlösningen: te ägg eller mjöl i en mängd av 2 ml. Till denna sättes ca 9 droppar koncentrerad salpetersyra till flockulering stoppas. Den resulterande blandningen upphettades, resulterande gula fällningen gradvis försvinner och dess färg går i lösning.

När vätskan svalnar i röret längs väggen sattes ca 9 droppar natriumhydroxid, koncentrerades, vilket är överflödigt för processen. Reaktionsmediet blir alkaliskt. Innehåll blir orange färg i provröret.

Dragen av

Eftersom ksantoproteinovaya kallas kvalitativ reaktion till salpetersyra genom verkan av proteinerna, är provet utförs under ingår dragskåp. Följ alla säkerhetsföreskrifter när man arbetar med koncentrerade frätande ämnen.

Frisättningen av innehållet från tuben kan uppstå under uppvärmningsprocessen som måste beaktas vid fastställandet den i en hållare och välja lutningen.

Uppringning av koncentrerad salpetersyra och kaustiksoda bör endast med hjälp av en glaspipett och päron gummi förbjuden pipett genom munnen.

Relativ reaktion med fenol

För tydlighets skull, process och bekräftelse av närvaron av fenylgrupperna utförs med ett liknande prov hydroxibensen.

Röret vilket gör 2 ml utspätt fenol, sedan gradvis längs väggen, sattes 2 ml koncentrerad salpetersyra. Lösningen utsattes för värme, varigenom det blir gul. Denna reaktion är kvaliteten på närvaron av bensenringen.

Process hydroxibensen nitreras med salpetersyra, följt av bildning av en blandning av p-nitrofenol och o-nitrofenol i en procentandel av 15 till 35.

Jämförelsetest med gelatin

För att bevisa att ksantoproteinovaya reaktion till proteinet avslöjar en aminosyra med aromatisk struktur, använder proteiner som inte har en fenolisk grupp.

I ett rent rör görs en% gelatinlösning i en mängd av 2 ml. Till denna sättes ca 9 droppar koncentrerad salpetersyra. Den resulterande blandningen upphettas. Lösningen inte färgade i gult, vilket bevisar frånvaron av aminosyror med en aromatisk struktur. Ibland finns en lätt gulfärgning av miljön på grund av närvaron av proteinföroreningar.

kemiska ekvationer

I tvåstegsreaktion körs ksantoproteinovaya proteiner. Formeln första stegets nitreringsprocessen beskriver aminosyra molekyler med användning av koncentrerad salpetersyra.

Ett exempel är fastsättningen av nitrogruppen till tyrosin för att bilda nitrotyrosin och dinitrotirozina. I det första fallet till bensenringen är fäst en NO ₂ -radical, och den andra föreningen har två väteatomer är ersatta med NR _2. Kemisk formel ksantoproteinovaya tyrosinreaktionen representeras av reaktion med salpetersyra för att bilda nitrotyrosin molekyl.

Nitreringsprocessen åtföljs av övergång färglös färg i gul ton. Vid utförande av denna reaktion med proteiner innehållande den aminosyraresterna fenylalanin eller tryptofan, och färg på förändringar lösningen.

Det andra steget är reaktionsprodukten av nitrering av tyrosin-molekyler, särskilt nitrotyrosin, med ammonium- eller natriumhydroxid. Resultatet är ett natrium- eller ammoniumsalt, i vilken den gul-orange färg. En sådan reaktion är relaterad till möjligheten att nitrotyrosin molekyler rör sig i kinoid form. Därefter salt bildas därav Nitronic syra, som har ett kinonsystem av konjugerade dubbelbindningar.

Sålunda slutar ksantoproteinovaya reaktion mot proteiner. Ekvationen ovan presenterade andra steget.

resultat

Under analysen av fluider som finns i de tre rör, är referenslösningen utspäddes med fenol. Ämnen med en bensenring ge kvalitativ reaktion med salpetersyra. Som ett resultat, det ändrar färg av lösningen.

Såsom är känt, innefattar gelatin en hydrolyserad form av kollagen. Proteinet innehåller inte den aromatiska strukturen av aminosyrorna. Utan färgförändring hos mediet genom reaktion med en syra.

I det tredje provröret finns det en positiv reaktion mot proteiner ksantoproteinovaya. Slutsats kan dras på följande sätt: alla proteiner med aromatisk struktur, vare sig det är en fenylgrupp eller en indolring, med tanke på den förändring i färg av lösningen. Detta beror på bildningen av nitroföreningar med en gul färg.

Genomförande av en färgreaktion bevisar närvaron av olika kemiska strukturer på aminosyror och proteiner. EXEMPEL gelatin visar att dess sammansättning innefattar aminokarboxylsyra som inte har en fenylgrupp eller en cyklisk struktur.

Med ksantoproteinovaya reaktion kan förklaras av gulfärgning av huden när den appliceras på det en stark salpetersyra. Samma färg blir skummig mjölk under sin liknande analys.

I klinisk laboratoriepraxis detta färgprov inte används för detektering av protein i urinen. Detta beror på att den gula färgen på urinen själv.

Ksantoproteinovaya reaktion blev allt användas för kvantifiering av aminosyror, såsom tryptofan och tyrosin, som en del av olika proteiner.